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細胞株的不同轉染方式有何區別？
原載自：www.yxqgjx.cn[行情動態] 2022-09-12 瀏覽次數：1000
細胞株的轉染是將外源性基因導入細胞內的一種專門技能。隨著基因與蛋白功用研討的深化，轉染目前已成為試驗室工作中常常涉及的根本辦法。轉染大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類途徑。電穿孔法、顯微打針和基因槍歸于通過物理辦法將基因導入細胞的范例；化學介導辦法許多，如經典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染辦法、和多種陽離子物質介導的技能；生物介導辦法，有較為原始的原生質體轉染，和現在比較多見的各種病毒介導的轉染技能。
細胞株轉染時的瞬轉和穩轉區別是什么？
瞬轉即瞬時轉染，是指將外源質粒通過某種方式導入到細胞內得以表達；
穩轉即病毒感染，是利用慢病毒將外源插入整合到宿主細胞的基因組，從而達到持久性表達。
由此可見，二者的區別即：
穩轉是基因組整合到宿主細胞基因組，跟隨細胞一起增值得以穩定遺傳；
瞬轉是質粒游離在細胞內，一個宿主細胞中可存在多個拷貝數，產生高水平的表達，但通常只持續幾天，但不能穩定遺傳。
細胞株進行轉染時轉染試劑的準備：
1.將400ul去核酸酶水參加管中，震動10秒鐘，溶解脂狀物。
2.震動后將試劑放在－20℃保存，使用前還需震動。
3.挑選適宜的混合比例（1：1－1：2/脂質體體積：DNA質量）來轉染細胞。在一個轉染管中參加適宜體積的無血清培育基。
4.將混合液在室溫放置10-15分鐘。
5.吸去培育板中的培育基，用PBS或者無血清培育基清洗一次。
6.加混合液，將細胞放回培育箱中培育一個小時。
7.到時后，依據細胞品種決議是否移除混合液，之后參加*培育基持續培育24-48小時。
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