ATCC細(xì)胞的分類檢測(cè)步驟如下：

　　1.樣本儲(chǔ)存

　　收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本，儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本，將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí)，-20℃可保存1個(gè)月。-70℃可保存6個(gè)月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。

　　2.試劑盒成分

　　人、綿羊、小鼠、大鼠、豬、兔、山羊、牛、馬、豬；植物細(xì)胞因子、骨代謝、細(xì)胞凋亡、激素內(nèi)分泌、活性多肽、肝纖維化、自身抗體科研Elisa檢測(cè)試劑盒。主要用于科研方面，不用于臨床診斷。可以用于檢測(cè)各種指標(biāo)。

　　相關(guān)操作方法：

　　1.取成年新西蘭大白兔，耳緣靜脈注射空氣處死后，取下兔子的雙腿，立即用75%乙醇浸泡。

　　2.移入細(xì)胞房內(nèi)，去除雙腿表面的皮毛及肌肉，剪取關(guān)節(jié)段，移至超菌工作臺(tái)內(nèi)。

　　3.PBS洗滌數(shù)次，用手術(shù)刀或彎剪將關(guān)節(jié)表面的軟骨組織取下。

　　4.軟骨組織塊靜置5min，棄去上層液體及懸浮組織，將軟骨組織剪成1mm3的大小。移到離心管中加3倍體積的0.25%胰蛋白酶，置入37℃的恒溫?fù)u床中，振蕩消化15-20min。

　　5.4℃靜置5min；棄上清，PBS洗滌，去上清。加入0.2%膠原酶II，置入37℃的恒溫?fù)u床中，振蕩消化2H。

　　6.加入生長培養(yǎng)基終止消化，反復(fù)吹打后依次通過200目濾網(wǎng)。收集濾液，1200rpm離心8min，棄上清，用DMEM*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

　　7.細(xì)胞傳代后放入預(yù)置有薄骨片或蓋玻片的培養(yǎng)板中進(jìn)行培養(yǎng)。細(xì)胞*展開后即可固定做原代鑒定。

上一篇 : 細(xì)胞株的增殖檢測(cè)技術(shù)探討    下一篇 :  細(xì)胞株入門知識(shí)講解

>> 返回首頁